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biologie

techniques de laboratoires pour laboratoire de brousse

prélèvements vaginaux

Prélèvements vaginaux

Prélèvement

2 écouvillons ; bien prendre exo, endocol, vagin

1er jour

-Ecouvillon n°1-à 2 lames

Lame n°1 + 1 goutte de sérum physiologique + 1 lamelle -à état frais (cytologie, trichomonas, levures)

Etaler en tournant l’écouvillon sur la lame n°2 ; laisser sécher et effectuer une coloration de Gram :

Noter les polynucléaires, la prédominance d’un germe, bacille de Doderlein (grand bacille gram+), Mobiluncus mulieris (bacille Gram – incurvés en vol de mouettes), Gardnerella vaginalis (nombreux petits bacilles Gram- intracellulaires), corynebactéries diphtériomorphes (bacilles Gram+ en paquets d’épingles)

Eventuellement faire un étalement sur une lame n°3 pour une coloration MGG

-Ecouvillon n°2

Ensemencer dans l’ordre : une gélose au sang cuit (GSC) à incuber sous CO2

Une gélose sabouraud chloramphénicol

2ème jour

examiner les colonies

Toujours confronter les résultats de l’examen direct (Gram) et de la culture.

Si odeur ++, se méfier des anaérobies

Aspect des colonies sur GSC :

-petites colonies très fines, transparentes = Doderlein -- arrêt

-colonies blanches, porcelainiques = staphylo epidermitis (gram : cocci G+ en grappes de raisin, catalase+) arrêt

- levures : odeur particulière ; voir sabouraud chloramphénocol

-colonies en gouttes de rosée, transparentes : strepto

-grosse colonies jaunes entérobactéries (Gram= bacilles G-) repiquage sur Drigalski

-petites colonies visqueuses Gram : Neisseria ? identifier (oxydase…)

-se méfier aussi de Listeria ( bacille G+, catalase+, esculine+, β hémolytique, à repiquer sur gélose au sang ANC)

-on peut également trouver des Moraxelles, du pyocyanique

lecture du Sabouraud chloramphénicol

3ème jour

lecture du Sabouraud chloramphénicol : filamentation

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