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biologie

techniques de laboratoires pour laboratoire de brousse

parasitologie coloration au lugol

COLORATION AU LUGOL

dernière modification le 02/18/2006

Principe :
La coloration au Lugol permet de mettre en évidence les kystes de protozoaires, spécialement d'amibes. Elle permet aussi la mise en évidence d'inclusions de Chlamydiae dans les cellules épithéliales (rarement utilisé).

Matériel :
Lugol, lames, lamelles, bâtonnets.

Mode opératoire :

On réalise en parallèle une coloration au Lugol et un examen direct non coloré mais éventuellement concentré.

  • Déposer sur la lame identifiée une goutte de Lugol et une goutte d'eau physiologique (ou sur 2 lames distinctes).
  • Déposer un petit morceau de selles ou le culot de concentration par une technique de Kato ou Ritchie dans chaque goutte.
  • Mélanger chaque préparation et la recouvrir d'une lamelle en évitant la formation de trop de bulles d'air (en avoir un peu permet de faire la mise au point facilement).
  • Observer la préparation au microscope, à l'objectif x40 : les kystes sont colorés en jaune-brun. Les membranes nucléaires et caryosome sont brun foncé tandis que les vacuoles se teintent en brun-rougeâtre.

Lugol : (aussi appelé colorant iode - iodure)

  • Iode 1 g
  • Iodure de potassium 2 g
  • Eau distillée QSP 1000 ml

Dissoudre d'abord l'iodure de potassium dans environ 30 ml d'eau distillée, ajouter l'iode et mélanger jusqu'à dissolution. Ajouter le reste d'eau distillée, mélanger,
Conserver dans un flacon en verre brun (à l'abri de la lumière) ou dans un flacon normal à bouchon noir entouré de papier aluminium.

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