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biologie

techniques de laboratoires pour laboratoire de brousse

HÉMATOCRITE

1. MACRO - MÉTHODE

Principe :
Prélèvement de sang veineux sur EDTA
Le sang est placé dans un tube gradué et centrifugé pour rassembler tous les globules rouges.
On lit directement la hauteur du volume occupé par les globules rouges dans le tube gradué que l'on rapporte à la hauteur totale de sang.

Matériel :
Tube gradué à hématocrite : diamètre = 0,6 cm, longueur = 9,5 cm, graduation : 0 à 100
Pipette Pasteur + poire. Centrifugeuse à main

Mode opératoire :
A l’aide de la pipette pasteur, remplir le tube de sang jusqu'à la graduation 100 ;
Centrifuger 10 minutes à vitesse maximum (à peu près 3000 t / mn)
Lire le résultat à la hauteur de la ligne de démarcation entre les globules rouges et la couche de leucocytes. S’assurer que l’on utilise la bonne série de graduations, vers le haut en direction du 100

Résultats :
Le chiffre lu est un pourcentage, le diviser par 100 pour obtenir la fraction de volume érythrocytaire.

2. MICRO - METHODE

Principe :
Le sang est placé dans un tube capillaire et centrifugé pour rassembler tous les globules rouges.
On lit le résultat rendu en fraction de volume érythrocytaire grâce à la réglette prévue à cet effet.

Matériel :
Tube capillaire : diamètre = 1,5 mm, longueur = 75 mm. Cire molle en pâte à modeler
Centrifugeuse à hématocrite ou à main si défaut. Réglette spéciale hématocrite pour la lecture

Mode opératoire :

  • Placer l’extrémité du tube capillaire cerclée de rouge dans le tube du prélèvement sanguin. Le sang pénètre dans le tube par capillarité, le laisser se remplir environ aux ¾.
  • Boucher, avec la cire molle, l’autre extrémité du tube capillaire, sur environ 2 mm.
  • Identifier les prélèvements sur chaque tube capillaire.
  • Déposer les différents tubes capillaires dans une des rainures du plateau de la centrifugeuse.
  • L’extrémité bouchée doit être sur le pourtour extérieur du plateau.
  • Centrifuger à grande vitesse.

Lorsque l'on a pas de centrifugeuse, on place les tubes à hématocrite numérotés dans un tube de grand diamètre au fond duquel on a déposé un peu de coton. Le coté pâte à modeler du capillaire est au fond du tube. On place ce tube dans la centrifugeuse à main et on pouline à pleine vitesse pendant 10 bonnes minutes.

Lecture :

  • Mesurer la hauteur totale de sang : T
  • Mesurer la hauteur des globules : G

On a : Ht = G/T

Valeurs normales :

  • Hommes : 0,40 -0,50
  • Femmes : 0,37 -0,43
  • Enfants (5 ans) : 0,38 - 0,44
  • Nourrissons (3 mois) : 0,35 - 0,40
  • Nouveaux nés : 0,50 - 0,58
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