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biologie

techniques de laboratoires pour laboratoire de brousse

recherche de BK

Recherche de BK

(technique de Dakar)

Préparation des solutions

Solution de Fuschine de travail à 1% q.s.p. 100ml

Peser 1g de Fuschine basique, la mettre dans un erlenmeyer de 100ml

Ajouter 10 ml d’alcool à 95° et agiter jusqu’à dissolution du colorant

Peser 5g de phénol et faire fondre à part dans 90 ml d’eau distillée

Ajouter le phénol dilué à la solution alcoolique de Fuschine

Placer la préparation au bain-marie à 60°. Ne pas chauffer directement à la flamme.

Filtrer la solution dans un flacon teinté de 100ml.

Conserver la solution à l’obscurité.

Noter le contenu et la date de préparation.

La solution devra être filtrée chaque fois que des précipités se forment.

H2SO4 à 25% q.s.p. 100ml

Mesurer 75 ml d’eau distillée dans un erlenmeyer

Ajouter lentement 25ml d’H2SO4

Laisser refroidir

Noter le contenu et la date de préparation

Ne jamais verser l’eau dans l’acide

Solution de bleu de méthylène à 0,25 % q.s.p. 100ml

Peser 0.25 g de bleu de méthylène ; placer dans un erlenmeyer

Ajouter 100ml d’eau distillée

Ajouter le phénol (acide phénique) 2 gr

Mélanger jusqu’à dissolution complète du colorant

Filtrer dans un flacon teinté de 100ml

Noter le contenu et la date de préparation.

Technique

Fixer la lame au méthanol

Verser la solution alcoolique de Fuschine

Chauffer la lame jusqu’aux premières vapeurs ( le faire 3 fois) => Attendre 5 mn

Rincer à l’eau distillée ; bien égoutter

Verser la solution d’acide dilué à 25% => Attendre 2 mn

Rincer la lame à l’eau distillée et bien égoutter

Verser l’alcool a 95° sur la lame => Attendre 3 mn

Laver la lame a l’eau distillée

Verser la solution der Bleu de Méthylène et laisser 30 secondes à 1 mn

Rincer la lame à l’eau distillée, égoutter et laisser sècher

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