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biologie

biologie

techniques de laboratoires pour laboratoire de brousse

COLORATION DE VAGO

Cette coloration est utilisée pour les colorations de Treponema, Leptospira et Borrelia

Matériel :
Lames étalées, colorants.

Mode opératoire :
Réaliser un frottis du prélèvement pathologique. Ne pas le fixer.

  • Recouvrir la lame d'une solution filtrée de mercurochrome à 2% pendant 3 à 5 minutes
  • Laver à l'eau distillée
  • Colorer pendant 5 minutes avec une solution filtrée de vert de méthyle à 2%.
  • Laver à l'eau distillée, laisser sécher
  • Examiner à l'objectif 100

Leptospira

Les bactéries apparaissent en violet clair sur un fond presque incolore. Il est nécessaire de disposer d'un bon microscope et d'un observateur averti.

Préparation des réactifs :

  • Solution de mercurochrome à 2 % :
    Ajouter 1 gramme de mercurochrome broyé très finement (ou de rhodochrome RP) à 50 ml d'eau distillée tiède. Agiter, laisser reposer puis filtrer. Conserver en flacon brun en filtrant de temps à autre.
  • Solution de vert de méthyle à 2 % :
    Broyer très finement (important) 1 gramme de vert de méthyle dans un mortier, ajouter 50 ml d'eau distillée frémissante. Agiter, laisser reposer puis filtrer. Conserver en flacon brun en filtrant de temps à autre.

Ces réactifs se conservent environ un mois (voir les résultats sur les lames). D'autres colorations sont possibles pour colorer ces bactéries (coloration de Fontana-Tribondeau entre autre). Cependant, elles requièrent plus de réactifs, ils sont plus chers et se conservent moins bien.

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